Этот сайт использует cookie для оптимизации своей работы. Используя этот сайт, вы даете согласие на размещение файлов cookie на вашем устройстве.

Использование и доступ к этой услуге регулируется Положением о конфиденциальности.

Roche Navigation Menu
Roche logo
  • Войти
  • Выйти
  • Поиск
med.roche.ru
  • Вверх
  • Главная
  • Search
  • Close search

						
							

Searching

    • Главная
    • Заболевания
      Заболевания Общая информация
      • Онкология
      • Рак легкого
      • Рак молочной железы
      • Гепатоцеллюлярная карцинома
      • Уротелиальный рак
      • Меланома
      • Опухоли с транслокациями NTRK
      • Рак щитовидной железы
      • Опухоли головы и шеи
      • Неврология
      • Рассеянный склероз
      • Оптиконевромиелит
      • Спинальная мышечная атрофия
      • Болезнь Альцгеймера
      • Гематология
      • Гемофилия А
      • Диффузная В-крупноклеточная лимфома
      • Фолликулярная лимфома
      • Иммунология
      • Ревматоидный артрит
      • Системный ювенильный идиопатический артрит
      • Гигантоклеточный артериит
      • Ювенильный идиопатический артрит
      • Инфекции
      • COVID 19
      • Грипп
      • Офтальмология
      • Диабетический макулярный отек
      • Возрастная макулярная дегенерация
      • Окклюзия вен сетчатки
      • Наше будущее
      • Болезнь Альцгеймера
    • Продукты
      Продукты Общая информация
      • Онкология
      • Тецентрик® (атезолизумаб)
      • Кадсила® (трастузумаб эмтанзин)
      • Перьета® (пертузумаб)
      • Алеценза® (алектиниб)
      • Котеллик® (кобиметиниб) + Зелбораф® (вемурафениб)
      • Зелбораф® (вемурафениб)
      • Фесго® (пертузумаб + трастузумаб)
      • Неврология
      • ОКРЕВУС® (окрелизумаб)
      • Эврисди® (рисдиплам)
      • Энспринг® (сатрализумаб)
      • Гематология
      • Гемлибра® (эмицизумаб)
      • Газива® (обинутузумаб)
      • Полайви® (Полатузумаб ведотин)
      • Иммунология
      • Актемра® (тоцилизумаб)
      • Инфекции
      • КСОФЛЮЗА® (балоксавир марбоксил)
      • Касиривимаб и имдевимаб
      • Актемра® (тоцилизумаб)
      • Тамифлю® (осельтамивир)
      • Геномное профилирование
      • FoundationOne CDx
      • FoundationOne Liquid CDx
      • FoundationOne Heme
    • Сервисы
      Сервисы Общая информация
    • Инновации
      Инновации Общая информация
      • Наше будущее
      • Болезнь Альцгеймера
      • Молекулярно-направленная терапия
      • NTRK+
      • ROS1
      • Прецизионная медицина
      • Диагностика перестроек генов
      • Геномное профилирование
      • Сервисы
      • Блог
    • Мероприятия
      Мероприятия Общая информация
      • Архив мероприятий по нозологиям:
      • Онкология
      • Неврология
      • Гематология
      • Инфекционные болезни
      • Офтальмология
      • Предстоящие мероприятия
      • Ближайшие мероприятия:
      • Пациент с ГЦК. Диалог химиотерапевта и интервенционного хирурга
    • Главная
    • Заболевания
      • Онкология
        • Рак легкого
        • Рак молочной железы
        • Гепатоцеллюлярная карцинома
        • Уротелиальный рак
        • Меланома
        • Опухоли с транслокациями NTRK
        • Рак щитовидной железы
        • Опухоли головы и шеи
      • Неврология
        • Рассеянный склероз
        • Оптиконевромиелит
        • Спинальная мышечная атрофия
        • Болезнь Альцгеймера
      • Гематология
        • Гемофилия А
        • Диффузная В-крупноклеточная лимфома
        • Фолликулярная лимфома
      • Иммунология
        • Ревматоидный артрит
        • Системный ювенильный идиопатический артрит
        • Гигантоклеточный артериит
        • Ювенильный идиопатический артрит
      • Инфекции
        • COVID 19
        • Грипп
      • Офтальмология
        • Диабетический макулярный отек
        • Возрастная макулярная дегенерация
        • Окклюзия вен сетчатки
      • Наше будущее
        • Болезнь Альцгеймера
    • Продукты
      • Онкология
        • Тецентрик® (атезолизумаб)
        • Кадсила® (трастузумаб эмтанзин)
        • Перьета® (пертузумаб)
        • Алеценза® (алектиниб)
        • Котеллик® (кобиметиниб) + Зелбораф® (вемурафениб)
        • Зелбораф® (вемурафениб)
        • Фесго® (пертузумаб + трастузумаб)
      • Неврология
        • ОКРЕВУС® (окрелизумаб)
        • Эврисди® (рисдиплам)
        • Энспринг® (сатрализумаб)
      • Гематология
        • Гемлибра® (эмицизумаб)
        • Газива® (обинутузумаб)
        • Полайви® (Полатузумаб ведотин)
      • Иммунология
        • Актемра® (тоцилизумаб)
      • Инфекции
        • КСОФЛЮЗА® (балоксавир марбоксил)
        • Касиривимаб и имдевимаб
        • Актемра® (тоцилизумаб)
        • Тамифлю® (осельтамивир)
      • Геномное профилирование
        • FoundationOne CDx
        • FoundationOne Liquid CDx
        • FoundationOne Heme
    • Сервисы
    • Инновации
      • Наше будущее
        • Болезнь Альцгеймера
      • Молекулярно-направленная терапия
        • NTRK+
        • ROS1
        • Прецизионная медицина
        • Диагностика перестроек генов
      • Геномное профилирование
      • Сервисы
      • Блог
    • Мероприятия
      • Архив мероприятий по нозологиям:
        • Онкология
        • Неврология
        • Гематология
        • Инфекционные болезни
        • Офтальмология
      • Предстоящие мероприятия
      • Ближайшие мероприятия:
        • Пациент с ГЦК. Диалог химиотерапевта и интервенционного хирурга
    • Войти
    • Выйти
    Закрыть

    1 - of Результаты ""

    No results

    Вы являетесь медицинским работником? Зарегистрируйтесь на портале для полного доступа к информации. 

    Зарегистрироваться
    • Использование технологии флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) для диагностики перестроек генов семейства NTRK с целью назначения терапии препаратом энтректиниб

      Прочитайте больше


    Вы здесь:

    1. Онкология
    2. Медицинские статьи
    3. Использование технологии FISH для диагностики перестроек NTRK

    Григорий Анатольевич Цаур,
    ГАУЗ СО «Областная детская клиническая больница», Екатеринбург, ул. Серафимы Дерябиной, 32
    ГАУЗ СO «Институт медицинских клеточных технологий», Екатеринбург, ул. Карла Маркса, 22а
    ФГБОУ ВПО «Уральский государственный медицинский университет Минздрава России», Екатеринбург, ул. Репина, 3

    Метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) широко используется для обнаружения химерных генов у пациентов с онкологическими заболеваниями для установления диагноза и для поиска мишеней с целью назначения таргетной терапии. С диагностическими целями наиболее широко применяются зонды для выявления перестроек гена SS18 (ранее известного как SYT) у пациентов с синовиальной саркомой, гена EWSR1 при саркоме Юинга, миксоидной липасаркоме, десмоплатической мелкокруглоклеточной опухоли, экстраскелетной миксоиодной хондрокарциноме и ряде других. В качестве примеров предиктивных маркеров, выявляемых методом FISH, можно привести перестройки генов ALK, ROS1 и RET при немелкоклеточном раке легкого.1 Еще одной мишенью, для выявления которой широко применятся данная диагностическая технология, являются перестройки генов семейства NTRK, включающего гены NTRK1, NTRK2 и NTRK32.

    Положительный результат FISH означает, что в исследуемом образце выявлена хромосомная перестройка (структурный вариант), включающая тестируемый ген, и в частности, один из генов семейства NTRK2. 

    Существует 2 варианта зондов для выявления перестроек генов семейства NTRK: 

    1. Зонды на точку разрыва (break-apart probes). При использовании данных зондов две части исследуемого гена и рядом расположенные последовательности окрашиваются разными (чаще зеленым и оранжевым, иногда красным) флуоресцентными красителями.

     При отсутствии перестройки какого-либо из генов семейства NTRK зеленые и оранжевые флуоресцентные сигналы располагаются рядом, часто перекрывая друг друга, что дает 2 желтых сигнала (соответствующих материнской и отцовской копиям гена), а при наличии перестройки – будут выявляться 1 зеленый и 1 оранжевый флуоресцентные сигналы по отдельности и 1 желтый сигнал (соответствует второй неизмененной копии гена в клетке (рис. 1, 3А).

    Также частным случаем перестройки любого из генов семейства NTRK является т.н. 5’ делеция, при которой начальная часть гена (она и обозначается 5’) утрачивается, но к сохраненному тирозинкиназному домену NTRK присоединяется ген-партнер, что и ведет к его постоянной активации. В этих случаях при флуоресцентной микроскопии выявляется 1 оранжевый флуоресцентный сигнал и 1 желтый сигнал (рис. 2). И при 5’ делециях и при обычных перестройках генов семейства NTRK порогом позитивности является величина в 20% от числа проанализированных клеток.

    Зонды такого типа потенциально могут выявлять любую перестройку в генах NTRK1, NTRK2 и NTRK3 независимо от гена-партнера.

    2. Двухцветные зонды с двойным слиянием (Dual color dual fusion probes) такой вариант зондов для выявления химерных генов предусматривает, что последовательность, комплементарная гену семейства NTRK и рядом расположенным регионам окрашивается каким-то одним флуоресцентным красителем (например, зеленым), а последовательность гена-партнера - другим флуоресцентным красителем (например, оранжевым). 

    При отсутствии перестройки искомых генов выявляются 2 зеленых и 2 оранжевых флуоресцентных сигнала, расположенные раздельно, а при наличии слияния генов детектируются по 1 зеленому и 1 оранжевому флуоресцентным сигналам (это неизмененные гены, например, NTRK3 и ETV6) и двум желтым сигналам (это прямой и реципрокный химерные гены (Рис. 4).

    Такой тип зондов применятся только для детекции самой частой из перестроек NTRK – ETV6::NTRK3. 

    Рисунок 1.
    Выявление перестройки гена NTRK1 у пациентки с диффузной формой дисэмбриопластической нейроэпителиальной опухоли, grade 1. Использован зонд ZytoLight SPEC NTRK1 Dual Color Break Apart Probe (Zytovison, Германия). Здесь и далее на рисунках в качестве примеров положительных результатов клетки с разделёнными флуоресцентными сигналами обведены белым контуром. Также в представленном поле зрения есть и другие позитивные клетки с наличием перестройки NTRK1 

    Рисунок 2.
    Выявление 5’ делеции  гена NTRK2 у пациентки с эмбриональной опухолью ЦНС, БДУ, Grade 4. Большинство клеток в поле зрения – триплоидные. Использован зонд ZytoLight SPEC NTRK2 Dual Color Break Apart Probe (Zytovison, Германия). Позднее с использованием панели FusionPlex Lung v2 panel (Invitae, США) и технологии высокопроизводительного секвенирования верифицировано наличие химерного транскрипта GKAP1::NTRK2 (ex10-ex13).

    Рисунок 3.
    Выявление перестройки генов NTRK3 (A) и ETV6 (Б), что соответствует наличию химерного гена ETV6::NTRK3,  у пациента с мезобластной нефромой. Использованы зонды ZytoLight SPEC NTRK3 Dual Color Break Apart Probe (Zytovison, Германия) и XL ETV6 Break Apart Probe (Metasystems, Германия). 

    Рисунок 4.
    Выявление химерного гена ETV6::NTRK3 у пациентки с инфантильной фибросаркомой.  Большинство клеток в поле зрения – полиплоидные. Использован зонд Fast Probe ETV6/NTRK3 t(12;15) Gene fusion Probe Detection Kit (Wuhan HealthCare Biotechnology, Китай).

    Рекомендации по диагностике перестроек генов семейства NTRK

    Согласно рекомендациям ESMO по диагностике перестроек генов семейства NTRK, метод FISH может использоваться как подтверждающий тест при гистологических типах опухолей с высокой частотой перестроек NTRK, таких как секреторная карцинома слюнной и молочной желез, инфантильная фибросаркома, мезобластная нефрома2.  

    Метод FISH демонстрирует высокую чувствительность в отношении хромосомных перестроек с каноническими точками разрыва. Однако существует вероятность ложноотрицательных результатов FISH при коротких парацентрических инверсиях и внутрихромосомных перестройках, которые встречаются среди перестроек гена NTRK1 (но описаны и для других генов), и могут быть интерпретированы как ложноотрицательные из-за недостаточного для расхождения FISH-сигналов3.

    Ограничением для широкого использования FISH для диагностики перестроек генов семейства NTRK при остальных солидных опухолях также является тот факт, что FISH не обладает способностью определять функциональное значение выявленной перестройки, то есть не представляется возможным установить, приводит ли данная перестройка к экспрессии химерного белка или является неактивным следствием хромосомной нестабильности опухолевого генома. В последнем случае в опухоли отсутствует экспрессия онкогенного химерного белка TRK - мишени для действия TRK-ингибитора4. Этим же недостатком может обладать и высокопроизводительное секвенирование (ВПС), когда в качестве исходного материала используется ДНК из ткани опухоли, а лишены этого недостатка лишь ВПС РНК-секвенирование, ОТ-ПЦР и, отчасти, ИГХ2.

    Еще одним из известных недостатков является то, что интерпретация результатов FISH является субъективной, что может привносить дополнительные ошибки при описании результатов гибридизации3. В качестве примера можно привести данные O. Gautschi et al, которыми описано два случая ложноположительных реакций FISH c зондами для генов семейства NTRK. Первый случай описывает карциному околоушной железы с пограничным результатом FISH для NTRK1 (18% положительных клеток). В образце не было выявлено экспрессии pan-TRK по результатам ИГХ, а также не выявлено перестройки по результатам двух различных методов анализа  (Oncomine Focus и Archer FusionPlex). Второй случай описывает аденокарциному желудочно-кишечного тракта, в которой методом FISH в 50% клеток была выявлена перестройка NTRK3, но при этом, по данным ВПС перестройки NTRK по не обнаружены. ИГХ во втором случае не было проведено из-за недостатка опухолевого материала5. 

    Показания для назначения TRK-ингибитора энтректиниб 

    Согласно общей характеристике лекарственного препарата (ОХЛП) энтректиниб, одобренной на территории ЕС, энтректиниб в виде монотерапии показан к применению у взрослых и детей в возрасте от 12 лет и старше с солидными опухолями, экспрессирующими химерный ген с участием нейротрофной рецепторной тирозинкиназы (NTRK):

    • у которых заболевание является местно-распространенным, метастатическим или в том случае, если хирургическая резекция, вероятно, приведет к тяжелым осложнениям, и
    • которые ранее не получали ингибитор NTRK;
    • у которых отсутствуют удовлетворительные варианты терапии6.

    Таким образом, в ОХЛП указано, что показанием для назначения препарата является наличие экспрессии химерного гена NTRK6. К исследованиям, которые позволяют определить функциональную активность перестройки относятся ИГХ с антителом к pan-TRK, полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) и ВПС2.

    Заключение

    При выявлении структурной перестройки с участим гена семейства NTRK методом FISH может быть рассмотрена возможность проведения дополнительного исследования для назначения лекарственной терапии. Поскольку опухоли с перестройками генов семейства NTRK встречаются редко, а их тестирование остается сложной задачей, положительные результаты тестов следует обсудить с экспертными центрами, имеющими доступ к различным методам диагностики, учитывая также общее состояние пациента, гистологический тип опухоли, количество и качество доступного биоматериала для исследования, возможность и риски проведения повторной биопсии, сроки проведения исследования, ожидаемую пользу и риски от назначения TRK-ингибитора, а также доступные варианты стандартной терапии.

    Вам может быть интересно:

    • 19.07.2022

      Опухоли с транслокациями NTRK

      Знание молекулярного профиля опухоли может открыть новые возможности таргетной терапии для лечения пациента.

    • 19.07.2022

      Диагностика мутаций NTRK

      Только с помощью чувствительных и специфичных тестов можно надежно выявлять транслокации NTRK.

    • 19.07.2022

      Частота мутаций NTRK

      NTRK является значимым биомаркером и онкогенным драйвером при многих типах опухолей.

        

    Список литературы:

    1. NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology (NCCN Guidelines®) Non-Small Cell Lung Cancer Version 5.2022 — September 26, 2022 Доступ от 04.10.2022
    2. Marchiò C. et al. ESMO recommendations on the standard methods to detect NTRK fusions in daily practice and clinical research. Ann Oncol. 2019 Sep 1;30(9):1417-1427. doi: 10.1093/annonc/mdz204.
    3. Hechtman JF. NTRK insights: best practices for pathologists. Modern Pathology. 2022;  volume 35, pages 298–305. https://doi.org/10.1038/s41379-021-00913-8 Ссылка
    4. Solomon JP et al. Detection of NTRK fusions: Merits and Limitations of Current Diagnostic Platforms. Cancer Res. 2019 Jul 1; 79(13): 3163–3168. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-19-0372.
    5.  Gautschi O. et al. Challenges in the Diagnosis of NTRK Fusion-Positive Cancers. Letter to the editor.J Thorac Onc. 2020 Jul 1; 15(7): 108-110 doi: 10.1016/j.jtho.2019.05.001.
    6. ROZLYTREK (entrectinib).  SUMMARY OF PRODUCT CHARACTERISTICS https://www.ema.europa.eu/en/documents/product-information/rozlytrek-epar-product-information_en.pdf Доступ от 15.09.2022

     

    M-RU-00009062 октябрь 2022

    Roche logo
    Дисклеймер

    На сайте присутствует медицинский контент. Подтвердите, что вы являетесь медицинским сотрудником.

    Да, являюсь Нет, не являюсь
    • © 2023 Roche Russia
    • 21.09.2023
    • Медицинская информация
    • Сообщить о нежелательном явлении
    • Положение о конфиденциальности
    • Правовое соглашение
    • Политика оператора в отношении обработки персональных данных

    Инструкции по медицинскому применению актуальны на момент создания материала. Актуальные инструкции размещаются на сайте roche.ru в Каталоге продукции. | АО «Рош-Москва», 107045, г. Москва, Трубная площадь, дом 2 эт/пом/ком 1, I, 42. Все права защищены | Информация на данном веб-сайте предназначена исключительно для медицинских работников.